[病例209]河北唐山唐海县十农场一南美白对虾池塘,面积10亩,水深1.3米,配备2台增氧机。2012年5月15日放养虾苗100万尾,5月31日放养虾苗30万尾。没套养鱼类。
6月2日虾开始有游塘、死亡,之后逐渐增多,到6月13日每天游塘、死亡的虾达到几百尾,高峰时一天最多死亡1000尾。每天都是下午大量游塘,特别下午3、4点钟特别多,早晨很少见到游塘虾。
6月13日上午10点到现场观察池塘水色黄绿色,透明度约40 cm。镜检藻类以小型绿藻为主,用简易测试盒检测水质,pH值9.1(平时测定多在8.6~8.7),溶解氧5 mg/L,氨氮、亚硝酸测不出(见图2)。发病游塘虾普遍体色发红,红尾红须,红肝红肠,空肠或肠道不饱满,有的肝脏外观模糊,有的尾部肌肉发白。
取游塘活虾6尾(见图3~4),现场接种肝脏做细菌分离培养和取肌肉病料带回公司研究所用PCR方法做病毒检测。结果有2尾病虾分离到了细菌(见图5)。病毒检测结果,6尾病虾白斑综合症病毒都呈阳性,1尾皮下及造血器官坏死病毒呈阳性,桃拉病毒都呈阴性(图6)。
分析:发病虾身体发红,取样的6尾游塘虾病毒检测都有白斑综合症病毒,游塘、死亡应该是白斑综合症病毒引起。游塘时间主要发生在下午阳光最强烈的时间,生物、水化指标也具有气泡病的发生条件,游塘虾有的也有尾部肌肉发白的气泡病症状,可见气泡病加重了白斑综合症的游塘和死亡。(利洋公司技术部 唐绍林 利洋水产药店十场店 于景艳提供 2012.08.02)
来源:利洋服务
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tangsl:图5为从南美白对虾肝胰脏中接种少量组织,在营养琼脂培养皿上划线,常温下细菌培养,从细菌的分离结果来看,第1只虾和第5只虾肝胰脏中细菌较多。
图6为南美白对虾白斑症病毒(WSSV)、桃拉病毒(TSV)和传染性皮下与造血器官坏死病毒(IHHNV)PCR(聚合酶链式反应)扩增后,电泳结果图。根据建立PCR检查方法时引物设计,白斑症病毒的预扩增片段长为296bp,桃拉病毒的预扩增片段长为231bp,传染性皮下与造血器官坏死病毒的预扩增片段长为350bp。图6中,第1个点样孔为DL2000 DNA Marker(DNA分子质量标准),从上往下的片段长依次为100bp,250bp,500bp,750bp,1000bp,2000bp。
第2至第7孔为6只虾白斑症病毒PCR检测结果,从图中可以看出,6只虾样品中均扩增出比250bp稍大一些的片段,与预期扩增片段(296bp)相符,因此,6只虾均感染白斑症病毒。
第8至第13孔为6只虾传染性皮下与造血器官坏死病毒PCR检测结果,从图中可以看出,6只虾样品中第6只扩增出在250bp和500bp中间的片段,与预期扩增片段(350bp)相符,因此,第6只虾感染传染性皮下与造血器官坏死病毒。
第14至第19孔为6只虾桃拉病毒PCR检测结果,从图中可以看出,无片段扩增出,6只虾无桃拉病毒感染。
(注:bp是指碱基对,碱基对是一对相互匹配的碱基,即A:T, G:C,A:U相互作用,被氢键连接起来,是形成DNA、RNA单体以及编码遗传信息的化学结构)
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