蛭弧菌及其在水产养殖动物疾病防治中的应用(3)

　　中国水产频道报道：

 

　　四、蛭弧菌在水产养殖业的应用
　　
　　目前，国内外关于蛭弧菌在水产养殖业上的应用研究多侧重于对环境水体的净化和水产养殖动物细菌性疾病防治两个方面。
　　
　　（一）水体净化
　　
　　秦生巨等人（1991）在自然河水中加入2.6×103cfu/ml噬菌蛭弧菌Bd81,并观察水质的变化情况，在48天的观察期间，水质的温度与细菌总数明显下降，而蛭弧菌的含量增加2～7倍，其它理化指标亦有所改变。王丽娜等人（1994）发现蛭弧菌的含量常滞后于水体污染，并且污染后，蛭弧菌可以在较长时间内维持高水平。这一特性可以指示水体污染的新旧及是否遭到连续污染。余倩等人（1994）对成都市的5条主要河流中的噬菌蛭弧菌进行了调查，发现蛭弧菌普遍存在，且噬菌蛭弧菌的含量与污染程度有关，污染越严重则含量越高。
　　
　　（二）疾病防治
　　
　　何义进等人对加入蛭弧菌的试验组与未加入蛭弧菌的对照组进行比较后，发现试验组成活率比对照组高19.4～15.5%，未发生暴发性细菌性鳗病。杨莉等人（2000）用不同浓度的蛭弧菌投入于水族箱中，对鲤用泡法进行人工感染气单胞菌试验，结果表明，蛭弧菌对嗜水气单胞菌有较强的裂解作用，对水体中氨氮有一定的降解作用，并对鲤鱼感染嗜水气单胞菌所致暴发性出血病有明显的预防作用。黄冬菊等人（2002）在试验中发现噬菌蛭弧菌对海水中的弧菌有强烈的捕杀清除作用。陈有长等人（2003）用有益微生物（光合细菌和蛭弧菌混合物）在中华绒螯蟹养殖中发现，试验组比对照组池塘中的细菌总数呈几何数量级下降，氨氮、硫化物含量及COD都明显减少，成活率分别提高了11.3%、13.5%和13.3%，并指出，使用噬菌蛭弧菌的浓度为107cfu/ml和光合细菌的浓度为109cfu/ml均为5ml/m3较为理想。
　　
　　曾地刚等人（2004）采用噬菌蛭弧菌预防和治疗斑点叉尾鱼回细菌性败血病时试验，结果显示，在试验水体中同时加入噬菌蛭弧菌和嗜水气单胞菌，当水体中的噬菌蛭弧菌浓度达到105/ml以上时有预防效果；采用背部肌肉注射嗜水气单胞菌的方法，使斑点叉尾鱼回感染，然后在水体中加入噬菌蛭弧菌，结果是试验鱼全部死亡，说明噬菌蛭弧菌不能起到治疗斑点叉尾鱼回败血病的作用。
　　
　　徐琴等人（2006）将球形红假单胞菌、噬菌蛭弧菌及粘红酵母用于中国对虾幼体培育水体，试验结果表明，与对照组相比，试验组的成活率、变态指数、体长均匀增长率、酚氧化酶和超氧化物歧化酶活力均优于对照组。试验结束后，试验组比对照组的细菌总数降低了三个数量级，添加噬菌蛭弧菌的组在减少异养菌方面有较好效果。同时用鳗弧菌攻毒，在5天内，对照组的死亡率明显高于试验组，试验组免疫保护率为29.4～58.5%，以噬菌蛭弧菌和球形红假单胞菌试验组最为显著，使用浓度以2×105cfu/ml为好。
　　
　　韩韫等人（2005）用从海洋中分离出来的4株蛭弧菌作为生物净化因子，对16株常见海产品潜在的食源性致病弧菌进行裂解试验，发现4株同时使用，可裂解15株弧菌，裂解率高达93.9%。
　　
　　五、蛭弧菌在水生动物养殖业中的临床应用及其生态效应
　　
　　自1989年江苏无锡地区首次应用蛭弧菌制剂防治育珠三角帆蚌的嗜水气单胞菌开始，到目前为止，蛭弧菌微生物制剂已成为水生动物细菌性疾病防治的主要选择的微生物制剂。经过近20年的发展和研究，我们对蛭弧菌微生物制剂的生态效应和缺陷已有相当了解。
　　
　　（一）安全性与有效性
　　
　　安全性评价可分为二个部分：一是安全可靠，二是无毒无害。为确保制产品无毒无害，应每批产品腹部注射小鼠3～4只，每只注射量为0.5毫升，观察4天后仍无死亡。如有个别死亡，应将小鼠加倍至6～8只重新试验。如仍有个别死亡，则该批产品应保留15～20天，然后再用10只小鼠试验，如仍有个别死亡，则认为安全性试验不合格。安全试验不合格的产品不能出厂。安全有效性试验用嗜水气单胞菌、副溶血性弧菌、溶藻弧菌等10种以上为宿主菌对所用的蛭弧菌和噬菌体生产的菌株进行效力测定。将宿主菌用适宜的培养基于37℃条件下培养16～18小时，制成悬液，然后用琼脂层叠法检测蛭弧菌、噬菌体对宿主菌的裂解除能力。制品中的蛭弧菌和噬菌体对上述测定的宿主菌的裂解率在80%以上时方为合格产品。如裂解率低于80%，应重新试验。如重试不合格，则认为该菌株不合格。不合格的菌株不得用于生产。用测定效力的菌株应有80%能上能下为标准菌株。
　　
　　（二）生态效应
　　
　　生态效应有生物拮抗效应和防病治病效果应等。蛭弧菌是正常微生物群体成员之一，它可以有序定植于动物体内的粘膜或细胞之间，形成生物屏障。这些屏障可以阻止病原微生物的定植，起到竞争位置和争夺营养、共生等生物拮抗作用。服用蛭弧菌制剂后，机体能产生生物防御作用。蛭弧菌制剂可以显著提高中国对虾幼体的变态率和存活率；用于南美白对虾、南美蓝对虾养殖时，成活率达到99%以上，增产率可达395.60～382.14%；对嗜水气单胞菌的裂解率在80%以上；可使由人工感染引起的甲鱼、河鲀嗜好水气单胞败血症的发病率降低85.5%，死亡率降低93.3%，增重率提高16%；对大菱鲆重症出血病的治愈率为98.7%；对弧菌的裂解率为87.8%，对九孔鲍病原性细菌的裂解率为32.4～87.5%。
　　
　　（三）制剂的使用方法
　　
　　应用蛭弧菌制剂于水产养殖时，可将制剂产品根据水质好坏适量施用，一般为每亩1米水深用量为250～1000毫升。在水产育苗生产中使用时，在不改变养殖条件和环境条件的情况下，可在苗种密集的水体中，每立方米水体用量为250～500毫升，浸浴2小时以上。如水生动物肠炎等肠道疾病症状明显时，可用蛭弧菌制剂拌饵投喂，每100千克饲料中加入500～1000毫升，搅拌均匀后将饲料晾干投喂。拌入蛭弧菌制剂的饲料禁止在0℃以下或45℃以上条件下存放。

 

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