中国水产频道原创报道，重新认识EHP。 文/ 水产前沿 李钒
图片来源网络 “我们最怕的就是虾长不大，一旦长不大养殖户就说是苗不好，或者认为是虾苗感染了EHP。” “现在客户都带着便携检测设备来苗场看苗，这是好事。但是有时候我们检测EHP结果不是阳性，他们检测出来是阳性，又没有国家标准作为指导，这也让我们很苦恼。” 近日，一些育苗从业人员告诉笔者。 然而，这并不是少数人的担忧。近期，在“第二届中国对虾种苗产业年会”举办前夕，笔者走访了部分苗企，得到的信息是现在大家都很重视检测，尤其重视EHP的检测，但检测结果的不准确性也伤害了苗企和养殖户的利益。 什么是EHP？ EHP全称是Enterocytozoon hepatopenaei，是一种微孢子虫寄生虫，2009年，首次在来自泰国的斑节对虾中发现并命名（Tourtip等人2009.J.Invertebr.Pathol.102：21-29）。 EHP局限于虾的肝胰腺（HP），形态上类似于在2001年澳大利亚的日本对虾肝胰腺中发现的一种未命名的微孢子虫。 当时的EHP是在生长缓慢的斑节虾中发现的，但在当时与生长缓慢无统计学相关性。 实际上自2003年起，泰国斑节对虾的养殖一直受生长缓慢综合征（MSGS）的影响，但一直没有确定病因。 后来发现，EHP还可以感染在亚洲进口的外来南美白对虾（Penaeus vannamei），并且可以通过口服途径直接从虾传播到虾（Tangprasittipap等，2013.BMCVetRes.9：139）。 有研究表明，这与先前从“棉花虾”中报道的最常见的微孢子虫不同，“棉花虾”中的微孢子虫传播需要鱼作为中间宿主，也就是说可以通过从养殖系统中排除鱼来阻断传播。 到了2013年，EHP首次在中国被发现。这个时间点在EMS（早期死亡综合征）暴发后不久，由于那时候大家都更关注EMS或急性肝胰脏坏死病（AHPND），因此并没有注意到EHP的危害。 为什么重新认识EHP很重要？ 有些人认为EHP是一个伪命题。 “这是为了掩盖虾苗种质退化所捏造出来的东西。” “有时候检测出来是阳性，虾苗一样可以养大。” “微孢子虫一直都存在，为什么现在才发现？” 这是一部分人的声音。实际上，科学家们已经有资料表明，EHP已成为中国、印度尼西亚、马来西亚、越南和泰国南美白对虾养殖的主要病害之一。虽然EHP似乎不会导致死亡，但虾农的信息表明它可能与南美白对虾的严重生长缓慢、规格大小不一有关。因此，在2009年以后，就有研究人员开始警告亚洲虾农和育苗场经营者，要监测南美白对虾和斑节对虾的亲虾和虾苗中是否感染了EHP。然而直到2014年前后，大家才真正开始重视EHP。 检测方法很重要 严格且精准的检测是确保种苗安全的手段，特别是对于EHP，只有精准的检测，才能减少养殖户以及苗场的损失。 据泰国国立玛希隆大学Centex Shrimp（泰国国家认证第三方机构）信息称，对EHP的认知有几点是很重要的。 1、EHP早期难发现，只能依靠PCR分子生物学的方法去检测对虾的组织主要存在于肝胰腺组织中）、排泄物（粪便）和水体中是否存在EHP； 2、微孢子虫有很多种，但Centex Shrimp的Timothy William Flegel教授判断，只有一种微孢子虫能导致对虾出现HPM（肝胰腺微孢子虫病）； 3、由于可能有其它微孢子虫的存在，受此影响，可能会导致假阳性的检测结果。也就是说，你检测出来是阳性，但未必是感染了会致病的微孢子虫。这个时候如果把这批苗排掉，可能会造成很大的损失。 4、实际上，泰国Centex Shrimp的研究人员可以应用巢式PCR避免假阳性EHP现象的出现，而且针对特定的孢壁蛋白SWP基因进行的新SWP-PCR（Spore wall protein primer，也称SPW-PCR）方法灵敏度更高，最大程度减少假阳性现象的出现。这是目前最准确的检测方法。 5、从泰方的研究人结果来看，有时候就算是检测出EHP是阳性，也不一定要把虾苗排掉，通过大量换水、降低密度，增强底排污、控制饲料投喂量等方式降低EHP的影响。据悉，目前泰国通过这些处理方式已经无惧EHP。 6、同时，Timothy William Flegel教授也透露，现在正与企业合作研究确定EHP在某个浓度时，是该选择排塘还是能继续养下去。 业界呼吁出台关相标准 “保证检测方法的正确是确保检测结果真实的前提，但是现在大部分的便携式检测设备还是只能定性，不能定量，质量也是参差不齐，也没有相关标准。”一位苗场的负责人说到。“遇到检测结果不确定时，基于对养殖户负责，我们宁错杀一千，绝不放过一个，但是这种方法并不科学。“ 伴随着生物安全检测需求的迅猛增长，水产养殖行业也出现了良莠不齐的增长态势。由于现在快检产品的生产厂家很多，各家产品的快检准确率有所不同。快检产品在实际操作中，既会有假阳性的情况，也会有假阴性的情况，这就会造成造成误判。 “我们建议国家有关部门制定检测产品生产企业的准入和产品认证等机制，对准确度、精密度、重复性、再现性、抗干扰性等进行实测，以此来评价检测设备的有效性，保证行业良性发展。” 比如在食品安全领域，快速检测是具有法律地位的，但是相关人事也表示，还没有哪个部门或者相关政策对快速检测产品质量进行规范，也没有出台食品安全快速检验方法比对验证规范，这与虾苗检测是一样的。筛选国内外快速检测方法，并将好的方法形成快速检测标准就显得至关重要。 |
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