过硫酸氢钾对五种水产动物病原菌的敏感性研究

　　前言：过硫酸氢钾复合盐高含量产品可做为消毒剂使用，但其相对传统消毒剂到底具备什么样的优势？其针对普通的水产动物病原菌在相关效果上到底表现如何？为了科学的回答这些问题，连云港永荣生物科技有限公司委托西南大学做出相应数据，希望对同行及相关养殖户有所借鉴。

　　

　　

　　鱼类繁殖与健康养殖中心

　　

　　西南大学（荣昌校区）| 重庆402460

　　

　　摘要：不同浓度条件下，试验了过硫酸氢钾对5种水产动物常见病原菌，包括柱状曲挠杆菌、荧光假单胞菌、嗜水气单胞菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌的药物敏感性。结果表明：过硫酸氢钾对这几种病原菌的MIC为3.1~5.7mg/L之间，MBC为4.5~8.3mg/L之间。

　　

　　

　

　　

　　1、材料与方法

　　

　　试验菌株选择水产养殖鱼类的常见致病菌，试验菌株取自农业部渔业动植物病原库。

　　

　　

　　试验药品＂过硫酸氢钾＂本试验所使用的过硫酸氢钾由连云港永荣生物科技有限公司提供，具体产品信息见表1。

　　

　　表一, 过硫酸氢钾产品信息

　　

　　

　　1.1.3  培养基

　　

　　选用肉汁胨培养基：蛋白胨10g，牛肉膏5g，NaCl 5g，H₂O 1000mL，pH 7.2～7.4，1.05 kp灭菌20min。

　　

　　1.2  方法

　　将各菌株接种到已灭菌的培养基上，培养24－48h后刮取菌苔，置于无菌生理盐水中摇匀，离心2次(4500r／min，每次20min)，收集沉淀，重悬于无菌生理盐水中，参照麦氏比浊管将菌液稀释到约107 CFU／mL。

　　

　　1.2.2 药液配制

　　

　　过硫酸氢钾用无菌水稀释1000mg/L备用。

　　

　　1.2.3  抗菌效果试验

　　

　　药敏试验采用滤纸片法，根据抑菌圈的大小，来判断菌种对药物的敏感性，是敏感，中度敏感还是耐药。干燥纸片的制备方法：选用吸水力强而且质地均匀的滤纸，用打洞机制成6mm直径的圆纸片，120℃干燥灭菌2小时。然后把配制好的各种适宜浓度的药液，每100张纸片加入1.0mL药液，使它均匀浸润，放在无菌平皿中，37℃使它干燥，分装小瓶中并封口，4℃保存。采用平板扩散法将培养的试验菌株以无菌水制成约106 CFU／mL的菌悬液，移取100 μL菌悬液至肉汁胨固体培养基上，推样器推匀，稍干后镊取无菌圆纸片贴放于接种过试验菌株的平皿培养基表面，使每片含100μg的药物，28℃恒温培养24h后，游标卡尺测量抑菌圈直径(郑钧镛等，1989)，见表2。

　　

　　1.2.3.2 最小抑菌浓度(MIC)测定试验

　　

　　使用试管稀释法。吸取预先配制好的药物母液1mL，加入灭菌试管中，加无菌水至9mL，每一试管再移取菌悬液1mL(预先培养18h，浓度约为107cfu／mL)，混匀，28℃恒温培养，24h后每管移取1mL至9mL无菌肉汁胨液体培养基内培养，肉眼观察，含最小量尚呈明显不混浊的试管所含药物的浓度为最小抑菌浓度(MIC) ，见表3，4。

　　

　　1.2.3.3 最小杀菌浓度(MBC)测定试验

　　

　　按液体培养基稀释法的操作方法测了药物的MIC，然后把未长出菌的各个试管培养液分别移种到无菌平板上，培养后凡是平板上无菌生长的药物最低浓度就是最小杀菌浓度（MBC），见表4。

　　

　　2、结果

　　

　　表二1，不同细菌对过硫酸氢钾的敏感性

　　

　　

　　2.2对几株细菌的最小抑菌浓度（MIC）试验

　　过硫酸氢钾对5株细菌的抑菌试验结果。“+/-”表示，2个平行组中1个为“+”、1个为“-”；“+”或“-”表示，2个平行组的结果相同，同为“+”或“-”， “+”表示有细菌生长，而“-”表示无细菌生长。每种病原菌的每个浓度梯度均设1个不加药物的阴性对照，以便于区别浑浊是由细菌繁殖造成还是药物本身产生的浑浊，抑或细菌由于其它原因造成了死亡（表2）。

　　

　　表二2，过硫酸氢钾对几株细菌的杀灭效果(mg/ L)

　　过硫酸氢钾对柱状曲挠杆菌等的MIC值见表3。

　　

　　

　　

　　过硫酸氢钾对柱状曲挠杆菌等的MBC值见表4。

　　

　　

　　结论

　　

　　过硫酸氢钾对水产动物常见病原菌有较强的抗菌力，过硫酸氢钾对试验的5种病原菌的MIC为3.1~5.7mg/L之间，MBC为4.5~8.3 mg/L之间。

　　

　　

　　

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