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虾苗细菌性玻化症

2020-7-15 10:06| 发布者: 御城雪| 查看: 49638| 评论: 0|原作者: 中国水产科学研究院黄海水产研究所王印庚等|来自: 水产前沿

摘要: 中国水产频道原创报道,2020年春季,新冠疫情正在全国各地肆虐,对虾苗种场“玻璃苗”现象也在沿海各地爆发。
  中国水产频道原创报道,

  文/图中国水产科学研究院黄海水产研究所王印庚等

  2020年春季,新冠疫情正在全国各地肆虐,对虾苗种场“玻璃苗”现象也在沿海各地爆发。该现象主要在苗种场和标苗场发生,患病虾苗表现为活力弱、体色暗浊,肝胰腺轮廓模糊、颜色变苍白呈淡黄色,组织解体呈玻璃样病变,空肠空胃,随之呈现急性死亡,养殖业者称之为“玻璃苗”。自3月份,该疾病首先在南方苗种场呈现爆发性趋势,并逐步在北方沿海一带蔓延,导致我国春季虾苗供应严重不足。同时,投放的劣质虾苗也导致早期对虾养成率明显下降,这势必对对虾产量产生重大影响。4月初至6月,中国水产科学研究院黄海水产研究所水产动物药理及疾病临床团队对广东、福建、浙江、山东、河北、天津等地苗种场进行样品收集和致病因综合分析。

  01、流行病学调查分析

  河北省沧州市坐落于渤海湾腹地,是我国最大的对虾苗种繁育基地之一,现有苗种场240余家,每年育苗能力约300亿尾。本团队对该地区多家对虾育苗场开展了流行病学调查分析。调查发现,发生对虾“玻璃苗”现象的苗种场占该地区的60%以上;大多数苗种场是采购外地虾苗(广东、福建、山东等地)经标粗后再次销售。一般标苗后2~3d即出现玻璃苗现象,随即24h内虾苗大部分死亡并排塘处置;甚至部分苗种抵运当天即出现该现象。依据患病程度不同,出现明显玻璃化症状的苗种数量可占个别苗池总数的80%。

  为进一步查明该区域对虾“玻璃苗”的主要致病原,选取了沧州市5个不同区位的苗种场,取患病和健康对虾及其养殖水体进行病原检测分析,编号依次为H1、H2、H3、H4、H5(表1)。分别通过病毒检测试剂盒、弧菌和可培养细菌分离鉴定、石蜡组织切片、超微病理学观察等手段进行病原及病理学分析。

  典型症状:

  患病虾苗表现为活力降低、厌食甚至空肠空胃,虾体消瘦、暗浊;肝胰腺轮廓模糊、组织解体萎缩、颜色变浅呈淡黄色,甚至肝胰腺区由正常的饱满褐色组织变为空白的玻璃化状态,进而使得头胸甲区域甚至腹部呈现瘦小、苍白、暗浊状态(图1)。

  图1,对虾“玻璃苗”临床表观症状(空心箭头为健康虾苗;实心箭头为玻璃苗)

  养殖系统细菌监测:

  通过使用对虾病原(IHHNV/EHP)荧光定量检测试剂盒(FRK-307)、桃拉综合症病毒(TSV)核酸检测试剂盒(DHelix)和对虾白斑综合征病毒(WSSV)核酸检测试剂盒(DHelix)进行常见病毒和微孢子虫携带情况分析,发现患有典型“玻璃苗”症状的虾苗均未检测出上述相关病原的携带。

  对五家育苗场共计10个单元的养殖水体及其虾苗肝胰腺组织中可培养细菌和弧菌的数量和种类进行检测分析,发现育苗水体的可培养细菌总量均在103数量级,弧菌占比高达40.2~97.4%(表1)。通过对不同场区患病虾苗分离得到的优势菌株进行分离鉴定表明,5个育苗场内的优势菌株均为弧菌,其中新喀里多尼亚弧菌、溶藻弧菌的检出率最高,且优势度较大;此外包括副溶血弧菌、欧文氏弧菌、塔氏弧菌、锡那罗州弧菌等不同种类的弧菌也被检出。

  经过初步的人工感染试验表明:新喀里多尼亚弧菌、溶藻弧菌两种弧菌均对凡纳滨对虾的PL5、PL20仔虾以及幼虾有很强的致病性,并可出现自然发病的典型症状。药敏试验分析表明,上述两种弧菌对常用的抗生素例如利福平、吡哌酸、链霉素、多粘菌素、青霉素、复方新诺明等有明显的耐药性。


  02、组织病理特征

  石蜡组织切片表明,患病对虾肝胰腺萎缩,肝小管上皮细胞坏死、脱落,肝小管中充斥大量的碎片组织并逐步褐化、黑化。随着感染程度的加剧,肝小管组织大面积坏死,残存少量的纤维化细胞基质结构,甚至完全消失,使得肝胰腺组织出现大面积空白区域,呈现玻璃化组织坏死(图2a)。

  超微组织病理检测表明,患病对虾肝胰腺和肠道内发现大量细菌,优势菌株为杆状菌且呈弧形。肝小管上皮细胞的细胞膜消融,细胞与细胞间界限模糊,细胞器解体,细胞核固化,细胞解体呈碎片并脱落到肝小管内;坏死的组织聚集形成大量的电子密度较高的黑化颗粒。肠道绒毛膜上皮细胞坏死、脱落,仅留下残存的固有层基质,充斥着大量的组织碎片和细菌颗粒(图2b);严重者,肠道绒毛膜组织大面积脱落,导致肠壁变薄。肌原纤维受损、萎缩,导致肌束间间隙增大,部分组织出现崩解现象。经过多种组织的观察,未发现病毒粒子的存在。

  图2,对虾“玻璃苗”病理特征

  a:虾苗HE染色,肝胰腺大面积坏死,呈现玻璃化病变(实心箭头);b:超微病理观察,前肠绒毛膜周围有大量细菌(空心箭头)

  03、“玻璃苗”的防控策略

  通过对河北省沧州市五家不同区位苗种场虾苗的细菌分离鉴定分析,表明新喀里多尼亚弧菌(Vibrio neocaledonicus)和溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)检出率和优势度最高;同时,这两种弧菌均对凡纳滨对虾的PL5、PL20仔虾以及幼虾有很强的致病性,并可出现自然发病的典型症状;超微病理检测也未发现病毒粒子的存在,由此排除了沧州地区发生的对虾“玻璃苗”由病毒感染引起的可能性。综上所述,初步判定对虾“玻璃苗”为细菌性感染引发的流行性疾病,命名为“虾苗细菌性玻化症”(Shrimp Postlarva Bacterial Vitrified Syndrome,BVS)。

  按照细菌性致病原的疾病特性,以生物安保为指导,提出通过选购SPF亲虾、加强苗种检疫、减少长距离苗种运输、做到提前预防、高效治疗等防控理念,以期实现对BVS的有效防治,其具体措施如下:

  (1)选购SPF亲虾:通过培育或选购SPF亲虾进行苗种繁育,可有效阻断病原的垂直传播途径,降低苗种对特定病原的携带,有助于提高后期标苗和养殖过程中对虾的成活率。

  (2)加强苗种检疫力度:结合区域内对虾“玻璃苗”发生情况和苗种溯源调查,严格检测外来苗种特定病原及可培养病原菌的携带情况,并在苗种入池前进行病原消杀工作。

  (3)减少长距离苗种运输:苗种长距离运输不仅会加大苗种应激反应,降低苗种存活率,同时也加快了病原在南北方、不同区域间的传播速度。通过近距离运输或繁育本地苗种,不仅加强苗种对本地环境的适应能力,同时降低折损率和运输成本。

  (4)防止病原交叉污染:做好进水、排水系统的管理,避免进水和排水系统的交叉污染;在水质管理上,不仅做到水质达标,更重要的是对有害微生物的严格消杀,防止含有病原菌的外源水或池水在不同养殖区域的相互串通;同时,做好养殖器具的消杀和专池专用,以降低病原的交叉性传染风险。

  (5)实现疾病的高效防治:针对特定病原研发专用防治技术手段,在养殖水体中使用过硫酸氢钾、聚六亚甲基胍等控制池水的细菌总量,并采用专用口服药物“玻立净”、“复合抗菌肽”等进行虾体内有害菌的控制。同时,定期检测水体和虾体中有害菌数量,评估虾体健康状况和疾病发生风险,及时做到对疾病发生的预警预报和有效防控。

  玻璃苗现象已在全国沿海普遍发生并对产业造成巨大的创伤。面对这一产业现状,我们亟需从流行病学角度出发,全面调查了解多地苗种产区的致病原种类是否相同,同时建立快速检测技术,查明病原的传播途径;另外,建立一套既实用且高效的疾病防控技术是其重中之重,为彻底解决苗种细菌性玻化症提供技术支撑和参考。 
  


  【关键字】:对虾  玻璃苗  病害  防治  水产养殖
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