本帖最后由 horsegreenhill 于 2016-4-6 15:50 编辑
自己扩培发酵活菌的误区 马青山博士
受到病害、台风及价格行情等因素的影响，今年水产养殖行业有些惨淡。养殖户通过多种方式控制成本，而自行扩培发酵活菌就是其中之一。不少养殖户自己捣鼓发酵，也有挺多这种形式的套装产品，但我发现在扩培的过程中存在挺多的误区和问题。下面就同大家进行分享： 1、 关于扩培的菌种 所使用微生物种类： 我在下面转市场发现，现在好像什么菌种养殖户都能扩培、什么菌种的产品扩培套餐都有，EM、芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌、光合细菌都全乎了。但我只推荐大家自己扩培乳酸菌、光合细菌，为什么呢？首先大家要注意，自己扩培最重要的是不能染杂菌！而乳酸菌兼性厌氧，并且扩培好的pH在4-5左右，一般杂菌难以生长；而光合细菌厌氧扩培，且培养基组分相对缺乏营养，也不易染杂菌。 下图是养殖户自己扩培的乳酸菌，密封发酵，扩培20h，扩培出来发酵液的活菌数我也跟着测了，有108cfu/ml，基本没有杂菌。所以说，厌氧密封的条件下，扩培还是比较容易成功的。
file:///C:/Users/DBN-PR~1/AppData/Local/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image002.jpg 不过，像EM、芽孢杆菌等，它们是需氧菌，也就是说你扩培的时候要敞着盖，某些产品说明书里还让大家通气、搅拌，这不就相当于接种杂菌么？另外，这两种菌扩培的pH在7左右，一般杂菌都能生长，整不好就扩培出有致病性的微生物，所以不建议自己扩培，不过大家倒是可以在使用前加点红糖，活化个2-4个小时泼洒，既不染菌，又增强了芽孢杆菌的活力。 下图是养殖户自己扩培的EM菌，大家可以看到其表面漂浮一层厚厚的白膜，这层白膜主要由需氧菌组成，理想的情况下是一些枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌，这样用起来倒是没什么坏处；但也不排除可能是某些致病需氧菌，那就比较麻烦了。所以自己扩培需氧菌，风险还是比较高的。
file:///C:/Users/DBN-PR~1/AppData/Local/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image004.jpg 菌种可用代数： 除光合细菌外，其他自己扩培的活菌不建议留种，原因有二：1、易染杂菌；2、菌种活力欠佳。而光合细菌菌种扩培最好控制在4代以内，4代以上，菌种活力明显下降。
2、 关于扩培的培养基 扩培的培养基一般有两个来源，一个是养殖户自己配制的，另一个是产品套装里带的，但不管是哪一种，都离不开一股子糖蜜味，为啥？1、糖蜜便宜；2、糖蜜提供碳源；3、扩培的发酵液一股香甜的糖蜜味，养殖户感觉味道好。但真正的扩培培养基是不加糖蜜的，大家可以看看下面的培养基： 实验室扩培芽孢杆菌、EM菌： 胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、NaCl 10g，配制1L培养基； 实验室扩培乳酸菌： 酪蛋白胨 10g、 酵母提取液 5g、葡萄糖 5g、乙酸钠 5g，配制1L培养基； 这种培养基可以迅速让微生物扩培生长，且营养均衡，能够达到较高的活菌数，但相对来讲会比糖蜜为主的培养基贵，不过，若大家直接去淘宝买大包装，也能便宜不少。
3、 关于扩培的方法 之前已经提到，微生物扩培发酵最需要注意的地方就是要严格控制杂菌的污染，而这里提到的扩培方法也主要是这方面的一些注意事项。 （1） 扩培活菌所用的桶、盆等容器最好消消毒，所用的水最好加热灭下菌。 （2） 不同微生物有自己适合生长的温度，一般而言，扩培建议在25摄氏度左右，比较适合现在应用较多的乳酸菌、芽孢杆菌等的生长。 （3） 为了防止污染，乳酸菌、光合细菌密封发酵，发酵期间不要搅拌；EM、芽孢杆菌等需氧菌发酵过程需要搅拌的，建议每桶配一根棍子，防止交叉污染。 （4） 每次取用后要严格密封放在阴凉遮阳处存放，需要长时间保存最好分装在小容器中。
4、 扩培终点的判断 不同的菌种，扩培终点的判断方法有所不同。一般而言，养殖户主要通过闻味道对发酵终点进行判断，除某些光合细菌外，扩培出来的发酵液味道以酸香味、酵香味为主，出现馊味、腐败味道，可能污染杂菌，建议不要使用。 除了闻味道，养殖户也可以自己测测pH值，像乳酸菌发酵终点pH值一般为4-5左右，芽孢杆菌、EM、光合细菌pH值一般为7-8左右。 最后，有条件的养殖户最好能用显微镜镜检一下，40物镜×10目镜即可清晰看到乳酸菌、芽孢杆菌等微生物，取发酵液自己看看，到底有多少微生物，是球的，还是杆的，等等。总之，有了显微镜可以更好地判断发酵好坏及发酵终点，具体方法就不在这里展开了，有需要的可以直接联系我详聊（QQ：416063411）。 注：此文属个人原创，谢绝转载！
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