鱼食性与肠道菌群关系的初步研究

cjlittlepig

摘自《水产科学》

摘　要：对淡水养殖池中的乌鳢、鲢鱼、鳊鱼、鲫鱼不同食性鱼的后肠菌群进行了定性、定量分析，结果表明：四种鱼的后肠壁和后肠内容物都是厌氧菌总数远大于好氧菌总数；后肠内容物菌数远大于后肠壁菌数；不同的鱼，后肠壁的好氧菌总数差别很大，而厌氧菌总数差别不大；后肠内容物中的厌氧菌总数和好氧菌总数为：乌鳢> 鲫鱼> 鲢鱼> 鳊鱼；而后肠壁细菌含量与食物没有明显的关系；后肠内容物和后肠壁中的双歧杆菌数为：乌鳢> 鲫鱼> 鲢鱼> 鳊鱼。表明后肠内容物中的细菌总数、后肠内容物和后肠壁中的双歧杆菌数都与食性相关。大肠杆菌、肠球菌和乳酸菌在后肠的分布没有规律，说明它们与食物相关性不强。

关键词：食性；鱼；肠道；菌群；好氧菌；厌氧菌；双歧杆菌

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    对鱼类肠道菌群组成的研究，国外曾有一些报道，但未见比较系统的研究。早在1953 年，Margolis发现禁食对鱼肠道菌有影响[1]。1976年Yoshimizu等对鱼肠道沙门氏菌进行了研究[2]。1985年Haruo等对淡水养殖池中罗非鱼、金鱼、鲤鱼等的肠道菌作了研究，指出了鱼肠道存在好氧或兼性厌氧菌、专性厌氧菌[3]。1987年Haruo报道淡水养殖池中弧菌—气单胞菌的稳定，而其它细菌受外界环境因素的影响较大[4]。但Hansen认为鱼类肠道不一定存在稳定的细菌群落[5]。目前，比较统一的认识是鱼类肠道存在细菌。国内对鱼类肠道菌群的研究起步相对较晚，主要集中在条件致病菌与肠道菌群关系的研究[6，、外界因素对肠道菌群影响的研究[8～和肠道菌群对宿主的消化和生长的影响研究[11，等，这些研究说明肠道菌群对鱼类的抗病、生长和发育有重要的意义。但几乎所有的研究都以肠道内容物为研究对象，对肠壁菌群的研究极少，对肠壁与肠道内容物关系的研究则没有。并且，大多数研究以好氧菌为研究对象，对厌氧菌的研究较少。赵庆新等发现不同亚科的鱼间菌群有较大的差异[13]，但这些差异由哪些因素引起，鱼食性影响肠道消化残渣，是否因此而影响居于肠道的菌群，值得探讨。本实验以4 种不同食性的鱼的后肠壁和后肠内容物中的2 种好氧菌、2 种厌氧菌以及好氧菌总数、厌氧菌总数为研究对象，试图揭示肠道壁与肠道内容物的菌群(包括好氧菌和厌氧菌) 之间的关系、鱼肠道菌群与食性的关系，以期为水产鱼类肠道菌群研究提供一些基础数据。

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1 材料与方法

1.1材料选择
    以4 种不同食性的鱼为实验材料：食浮游植物食的鲢鱼、草食性的鳊鱼、肉食性的乌鳢以及杂食性的鲫鱼。样本采集于绍兴文理学院生物系淡水养殖场。体重013～015 kg ，体内外均无伤病，肠道充盈度较好。每种鱼3 条，重复3 次。

1.2菌液的制备
    鱼体随机采集后，用75 %酒精进行鱼体消毒。无菌条件下解剖，取出肠道。75 %酒精棉球擦拭肠管外壁，无菌水反复冲洗，用无菌棉线结扎中肠与后肠、后肠与肛门交界处。剖开后肠，取内含物015 g。再用无菌水将后肠壁冲洗3 遍，剪碎，称取011 g 放入装有玻璃珠的三角瓶内。再分别稀释得到10- 2 ，10- 3 ，10- 4 ，10- 5 ，10- 6 ，10- 7 ，10- 8稀释液。

1.3细菌的分离培养
    选用国内外学者常用的几种培养基进行好氧菌总数和厌氧菌总数以及各种肠道细菌的分离培养[7，8，10，14](表1) 。

1.4细菌的计数及鉴定
    经FWA ，EG培养后选菌落数在30～300 个之间的平板进行好氧菌总数和厌氧菌总数计数，并换算成每克样品所含菌数量(cfu/ g) 。
        4 种细菌的鉴定及定量按康白等介绍的方法进行[7，8，14，。先鉴定4 种选择性培养基的选择性：对每个选择性培养基平板选6个典型菌落进行菌落特征、细菌形态及生理生化特性鉴定，结果证明4种选择性培养基具有高度选择性，即各选择性培养基上的典型菌落就是所需菌落。再对每种培养基上的典型菌进行平板菌落计数，并换算成每克样品所含菌数量(cfu/ g) 。

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2 结果与讨论
    菌群测定的定量结果见表2 。
    由表2可知：各种鱼的后肠壁和后肠内容物都是厌氧菌总数远大于好氧菌总数，厌氧菌是肠道菌群的主要组成成分；好氧菌总数、厌氧菌总数、肠球菌、大肠杆菌、乳酸菌、双歧杆菌都是后肠内容物的远大于后肠壁，说明细菌的生长繁殖场所主要在肠腔。
    不同种鱼后肠壁的好氧菌总数差别很大(如鲢鱼后肠壁好氧菌总数是鲫鱼后肠壁好氧菌总数的58倍) ，而厌氧菌总数差别不大(最大数鳊鱼与最小数鲢鱼之间的比值仅为214 倍) 。人肠道菌群在肠道有3个生物层，深层为厌氧菌并和肠壁共生形成生物膜，中层为一些厌氧菌，表层为好氧菌游动于肠腔[16]。鱼类可能也有厌氧菌与肠壁共生形成生物膜，因此含量稳定，而好氧菌可游离于肠腔中间，因此在肠壁的随机波动性很大。
        4 种鱼的后肠内容物中的厌氧菌总数和好氧菌总数为肉食性的乌鳢> 杂食性的鲫鱼> 以浮游植物为食的鲢鱼> 草食性的鳊鱼，说明后肠内容物细菌数量和食物的种类有关，也间接的说明后肠内容物的细菌是靠吸收后肠内容物中的养分生存。4 种不同食性鱼后肠壁细菌含量与食物种类没有明显的关系。
        4 种不同食性鱼肠道的后肠内容物和后肠壁中的双歧杆菌都是：肉食性的乌鳢> 杂食性的鲫鱼>以浮游植物为食的鲢鱼> 草食性的鳊鱼，这4 种鱼的寿命长短也是乌鳢> 鲫鱼> 鲢鱼> 鳊鱼，许多研究表明双歧杆菌与生物的寿命成正相关[17，，这里也体现了这种相关性，同时说明双歧杆菌的数量与食物种类有关系，肉类食物比植物类食物更适宜双歧杆菌生长，更有利于长寿。大肠杆菌、肠球菌和乳酸菌在后肠的分布没有规律，说明它们与食物的相关性不强。

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华农小渔民

这篇文章作者是谁呢？
华中农业大学陈孝煊做鱼类肠道微生物做的比较多。

cjlittlepig

华农小渔民 发表于 2012-8-7 21:14
这篇文章作者是谁呢？
华中农业大学陈孝煊做鱼类肠道微生物做的比较多。

作者清单：尹军霞, 张建龙, 沈文英, 石巧红, 顾海凤。
你是陈孝煊的学生吧？对他这么了解？你是做哪方面研究的呀？我们交流交流，啊啊。