在线交流 | 如何扩培沼泽红假单胞菌、乳酸菌种、芽孢杆菌？

亲朋好友

什么时候开讲还是发微信?

一片云

亲朋好友 发表于 2016-6-16 20:43
什么时候开讲还是发微信?

已经讲完了，由于今晚我的网速慢，所以没来得及更新

cuangjin

等整合语音和文字

cuangjin

一片云 发表于 2016-6-16 14:48
以上就是今晚的内容，剩下的内容我明天再上传吧

姐姐辛苦了

一片云

今晚的网速让我抓狂啊，一会有一会没

郭海振

谢谢群主提供这一个好的机会

0928

不简单啊！码这么多字，花很多时间，辛苦啦！多谢！感恩！

郑东风

等着学习晚上好好听

鱼康康

谢谢群主精彩分享

wx_u4eBgRbM

我可是用流量进来的

邓立惠

学习……提高

郭海振

很好的学习机会

郭海振

谢谢群主精彩分享

郭海振

很好的学习机会

cuangjin

姐姐 辛苦了 么么哒

一片云

6月18日晚交流的内容
乳酸菌的建议扩培及应用


目前乳酸菌制剂在水产养殖业中，泼洒在水体中的量远远大于拌料内服的量。其在畜禽养殖业中不会泼洒到环境当中，而是通常添加在饲料中，但是用量不大。

　　一、乳酸菌简介
　　


　　通常我们所说的乳酸菌也叫乳酸杆菌。乳酸菌指发酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。凡是能在葡萄糖或乳糖的发酵过程中产生乳酸的细菌统称为乳酸菌。除极少数外，其中绝大部分都是动物体内必不可少的且具有重要生理功能的菌群。人类肠道含有大量的乳酸菌群。养殖动物的肠道里面（尤其是恒温动物）含有大量的乳酸菌群，水产养殖动物的肠道中也有。
　　
　　常见的菌种主要包括嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌等，这些都属于兼性厌氧、革兰氏阳性菌。在有氧的条件下它们同样也是能够存活和继续繁殖。
　　
　　我们在超市里面买的各种各样的酸奶实际上都是很多种被卫生部批准用于人食用的乳酸菌的发酵产物。咱们定期的在食物中补充一定的酸奶能够促进消化，增加肠道内的有益菌群数量，提高免疫能力。
　　
　　今天讲的主题是干酪乳杆菌，以它为代表，把它放在水产养殖业中是因为干酪乳杆菌的功能正好被水产养殖业能够利用到，而且我们认为它比其它几种乳酸杆菌的效果更好一些。

一片云

　　二、乳酸菌在水产养殖中的作用


　　
　　乳酸菌在水产养殖业中的作用主要体现在以下几条：
　　
　　1.肉眼可见的：诱食、肥水； 用于外环境的时候，早上用第二天肉眼就可以见到鱼的食性增强。比如说在没有用乳酸菌之前，吃食鱼在早上的欲望比较低，吃食鱼的面积相对来说小一些。用了乳酸菌之后，第二天早上同样的时间段你再去投喂，会发现吃食鱼的面积明显比没有使用乳酸菌前扩大了，而且是很明显的扩大了，跟下午是一样的。这就说明，它有一个肉眼可见的诱食作用。其实这个诱食的作用就是改良了水质。 还有一个，你会发现用了之后水通常会变肥。变肥指的是水体当中的微生物、浮游植物、原生动物、浮游动物等在水体当中数量变多了，也就是增殖了，多了之后我们肉眼看到的就是水变肥了，就是这么一个现象。
　　
　　2.间接的增氧、改良水质；
　　
　　乳酸菌由于它把水体变肥了，会对水体产生间接的增氧作用。虽然它本身不产氧，但是它培养了大量的浮游植物，因此间接的增氧作用是很明显的。
　　
　　3.喷洒在饲料上投喂，增加养殖动物肠道内有益菌，显著提高饲料利用率；提高免疫力，降低肠道疾病发生率。
　　
　　在水产养殖中，我们也会把乳酸菌制剂按照一定的比例喷洒到饲料中投喂，增加养殖动物肠道内的有益菌（当然这个要求就是你拿到的乳酸菌制剂是真的是活菌，而不是纯的代谢产物，这个问题我想后面要专门说一下）。
　　
　　喷洒到饲料上可以显著的提高饲料的利用率、降低饲料系数，提高养殖对象的免疫力，降低肠道疾病发生率。
　　
　　这里有些科研的报告，我想给大家说一下。我们用乳酸菌投喂之后和之前草鱼肠道内的肠壁皱褶发生明显的改变。饲料添加乳酸菌其结果是中肠、后肠的肠壁皱褶都明显的变多了、变长了、变密了，意味着肠道内壁的表面积扩大了。食物和肠道内壁的接触的表面积扩大之后，它吸收食物当中的有效成分的速度就更快了，消化功能也提高了，食物的分解更彻底了，营养吸收得更多了，结果有效地降低了饲料系数，提高了肠道内的有益菌的数量。
　　

　　根据2008年农业部批准的使用的饲料添加剂中的安全微生物，农业部的公告1126号文件，实际上有十多种都是乳酸菌。

　　干酪乳杆菌
　　
　　今天讲的干酪乳杆菌我们称之为水产专用，因为在相应的对比实验中干酪乳杆菌应用到水环境中的效果比其它的乳杆菌表现得更突出一些，虽然这个差别不是特别的明显，但是我们还是认为以这种菌为主的话可能得到的结果会比其他的嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌为主的效果好。

一片云

三、菌种来源
　　


　　菌种经过农业微生物学国家重点实验室保种和选育，然后经过华中农业大学生命科学技术学院一级扩培，再到我们公司的二级扩培，最后做成成品来销售。
　　
　　之前，乳酸菌主要还是用在城市生活污水处理当中，在这个过程当中我们发现把乳酸菌运用到水产养殖业上也可以起到很好的效果，因此乳酸菌在08年的时候我们才开始逐步的往水产养殖业上推广干酪乳杆菌，实际上我们现在生产的是以干酪乳杆菌为主的复合乳杆菌。
　　
　　我就不再重复地去介绍我们的华中农业大学生命技术学院了。因为在之前已经讲过了。

一片云

　　四、乳酸菌的扩培


　　
　　乳酸菌简易扩培需要的设备（我们现在讲的都是简易扩培，指的是大型的养殖户或者小养殖户都可以做到）
　　
　　1、容积1吨或者0.5吨的不透明的塑料罐，白色为宜。如果你是小养殖户，可以采取有盖的白桶，密封的都是可以。
　　
　　2、恒温电加热控制装置，因为乳酸菌在恒温动物中大量的存在。比如说我们人类的体温正常体温36.5℃左右，差别不会太大。猪马牛羊鸭等也基本上是37-40℃这个样子，体内的温度相对来说是非常稳定的。在培养乳酸菌制剂的过程中也要求培养的温度基本保持在38℃。
　　
　　3、自来水——无菌水制备设备，和家里送来的纯净水实际上就是用这个设备做出来，原理是一样的，有大有小，大家可以看到后面的课件上的不锈钢的设备。
　　
　　4、功率不超过100瓦的潜水泵。潜水泵起的作用是不断的在罐体内搅拌，把容易沉到底部的比较的培养基均匀分布在罐体内（被我们的菌种利用掉）。
　　
　　这些设备温控装置很简单，你也可以做得更精致一些，像图像上这种温控装置的成本大概不到200块钱。如果你要做得更精致一点的话，可能要加一个配电箱（相应的东西全部装在配电箱里面），再配上一个温度探头再配上一个U型的加热管，加起来的成本可能就超过300块了。
　　

　　大家看干酪乳杆菌简易扩培设备这张图，图中罐体中只有1/3的发酵，这是一个浓缩发酵。也就是一组培养基+一组菌种，然后只加了330kg无菌水，最后再发酵的过程。也就是有些企业做1L的产品，1L EM菌或者乳酸菌用于3亩的水体的这样一个浓度的浓缩液。也可以把罐子里面的无菌水（990kg）全部加满，做成一般的市场上5升的瓶子装用于5亩水体的浓度的稀释液。浓缩和稀释的实际上最后的比例是一样的，用量的比例是一模一样的。
　　




　　另外一个罐子无论是方的还是圆的都不影响产品的质量。
　　
　　自动温控搅拌装置
　　


　　大家可以看到一个很简单的塑料的潜水泵和一个热得快。热得快是针对小型养殖户的，他用这种就可以了。但这热得快只有1.5千瓦，它比较容易烧坏。建议如果用1吨的大罐子去做简易扩培的话就用3千瓦的工业用的加热管，加热管相对来说，速度更快，而且不容易坏，这张温控设备上有一个电子温控器和空气开关这都是为探头服务的。
　　


　　不锈钢过滤罐
　　




　　无菌水从不锈钢过滤罐的上方进入，从下方出来（图片没有把下方照出来）然后通过紫外灯的灭菌装置一头进一头出，那么基本上可以把水当中的杂质以及浮游植物和所有的微生物都能够杀死掉了，接近于纯净水的标准（我们说的无菌水就是这个意思）。通过这两个设备得到的就是无菌水，这个无菌水我们就把它加入罐体当中。

一片云

　　五、干酪乳杆菌菌种定向培养基
　　


　　照片当中只照到了5个5L的瓶子，其中2个比较浅的灌得比较满的咖啡色瓶子是两瓶菌种，剩下的3瓶就是培养基。实际上标准化的是4瓶培养基，图片上只照了3瓶。
　　
　　1、培养基的原料配方
　　


　　浓缩乳酸菌原料配比：10L菌种+ 330kg的无菌水；
　　
　　成品乳酸菌原料配比：10L菌种+990kg的无菌水
　　
　　2、培养方法
　　


　　①        首先将乳酸菌的浓缩培养基加适量的水煮沸5分钟以上（大家记住一定要煮沸5分钟以上），杀灭其中所有的微生物。如果不到5分钟，没有煮沸，那么做出来的杂菌可能就比较多。
　　
　　②        补充无菌水到330kg，或者做直接的产品，那你就直接补到990kg。
　　
　　③        加入菌种开始培养，培养的过程把培养液的温度保持在35-40℃，建议直接在温度控制开关上把它调整到38℃，这是最合适的。
　　
　　在38℃恒温条件下培养36-48个小时，基本上可以完成培养。如果你要做稀释的，那在这个时候再加入660公斤无菌水就可成为乳酸菌的成品，灌装或者直接使用。
　　
　　乳酸菌的稀释成品和浓缩成品到底有什么区别？无非就是浓缩的1L用3亩水体而稀释的1L只能用1亩水体，所以大家在市面上买的相应的乳酸菌类的产品，5升装的如果用5亩说明他用的是我们说的990公斤水加上培养基和菌种做出来的。如果1L的产品可以用3亩水体那就是浓缩的方法做出来的（还能不能更浓缩了呢？不能了）。
　　
　　乳酸菌的浓度问题，因为乳酸杆菌是有体积的，虽然它很小。目前这种大规模的工厂化生产，简易扩培的方式，能够做到的最高浓度基本上也就是我刚才讲的330kg无菌水+一组定向培养培养基+菌种，然后灌装出来的成品。如果你同样灌装5L的油壶，你就可以用到15亩水体。