枯草芽孢杆菌对泥蚶及养殖底泥中细菌总数和弧菌总数的影响
——摘自《海洋科学》 摘要: 以平板计数法, 研究了不同浓度枯草芽孢杆菌对泥蚶及养殖底泥中细菌总数和弧菌总数的影响。试验分为1 × 10^6 , 5 × 10^6 和10× 10^6 CFU/L 3 个浓度试验组和对照组, 试验共进行28 d, 在第0、7、14、21 和28 天时采底泥和泥蚶, 采用平板计数法检测细菌总数和弧菌总数。结果显示, 在投施枯草芽孢杆菌后7 d 内, 养殖底泥和泥蚶体内细菌总数均呈明显上升趋势, 7~ 28 d内缓慢下降, 但差异不显著; 投施枯草芽孢杆菌后, 各试验组底泥和泥蚶体内弧菌总数显著低于对照组, 5 × 10^6 CFU/L 和10 × 10^6 CFU/L 试验组弧菌总数显著低于1 × 10^6 CFU/L 试验组。结果表明枯草芽孢杆菌具有抑制弧菌增殖的作用, 枯草芽孢杆菌可应用于泥蚶池塘养殖。 关键词: 泥蚶; 枯草芽孢杆菌; 细菌总数; 弧菌
近几年, 随着中国滩涂和围塘贝类养殖规模的扩大, 在每年温度上升的4、5月份和繁殖后的9、10月份, 主要滩涂养殖贝类易发生病害死亡, 在浙江沿海养殖的泥蚶、青蛤、缢蛏和文蛤都发生不同程度的病害死亡,严重影响了养殖效益, 研究工作者们正在从不同研究角度探索可能的解决对策。 枯草芽孢杆菌是目前广泛应用的一类益生菌, 可改善养殖水体环境质量和维持养殖动物消化道微生境的生态平衡, 提高养殖动物免疫能力, 以及促进动物生长等, 且无污染、无残留、不产生抗药性, 无水产品质量安全隐患, 具有广泛的应用前景。近年来, 国内外学者对枯草芽孢杆菌的分离和培养条件优化、枯草芽孢杆菌的免疫促进作用和环境改良, 以及与病原微生物的对峙试验都进行了大量的研究工作, 而上述研究大都集中在养殖鱼、虾方面, 而关于养殖贝类研究报道甚少,对泥蚶的研究还未见报道。本研究通过在泥蚶养殖过程中投施不同浓度的枯草芽孢杆菌, 研究不同浓度的枯草芽孢杆菌对泥蚶及养殖底泥中细菌总数和弧菌总数的影响, 探求芽孢杆菌的抑菌效果, 以期为泥蚶养殖环境的改良和泥蚶产品质量控制提供参考数据。
1. 枯草芽孢杆菌对底泥和泥蚶体内细菌总数的影响 结果显示, 投喂枯草芽孢杆菌后7 d 内,各试验组中的底泥和泥蚶体内细菌总数( 包括芽孢杆菌) 不断升高, 呈现相似的增长趋势, 底泥中细菌总数最高峰达到了2.51 × 10^13 CFU/g, 在7 ~ 14 d后显著降低, 细菌总数基本保持稳定; 在14~ 28 d 内基本保持平衡, 14、21 和28 d 时, 各试验组底泥和泥蚶体内细菌总数都显著低于对照组水平。
2. 枯草芽孢杆菌对底泥和泥蚶体内弧菌总数的影响 在投喂芽孢杆菌的前7 d 内, 3 个试验组中的底泥和体内弧菌总数显著降低, 呈现相似的下降趋势; 投施枯草芽孢杆菌后, 各试验组底泥和泥蚶体内弧菌总数显著低于对照组, 5 × 10^6 CFU/L 和10 × 10^6 CFU/L试验组弧菌总数显著低于1 × 10^6 CFU/L 试验组。28 d 时, 10 × 106 CFU/L 试验组底泥和泥蚶体内的弧菌生长达到最小值, 底泥为1 × 10^8 CFU/g, 泥蚶体内为63 CFU/g。
3. 结论 枯草芽孢杆菌可作为一种水质调节剂, 净化养殖水环境, 枯草芽孢杆菌降低养殖水体氨氮、亚硝酸盐和COD 等方面的研究已有报道, 丁雷等报道芽孢菌能改善养鱼水质; 刘颖等报道在养殖水体中加入特定的芽孢杆菌及酵母菌, 能使其定殖于养殖水体, 生长繁殖后测定各项水质指标, 证明其能迅速而有效地降低水中亚硝酸盐的含量, 并对水中溶氧的影响较小, 能够有效地改善养殖水体的水质状况。同时, 枯草芽孢杆菌作为益生菌, 对弧菌等条件致病菌具有明显的抑制作用。王芳等报道了枯草芽孢杆菌中富含抗菌成分, 并提纯了其抗菌活性成分; 黄汝添等研究了枯草芽孢杆菌Bs-1抗菌物质产生的特点和对溶藻弧菌的拮抗能力, 结果表明Bs-1 产生的抗菌物质能抑制多种分离自养殖大海马肠道和海水的弧菌如溶藻弧菌的生长; 每升海水中加入4mL培养液( 4×10^6 CFU/mL) 已能达到较好的抑菌效果。伏传永报道枯草芽孢杆菌对刺参病原菌具有很强的拮抗作用; 陈莉等采用平板对峙法测定枯草芽孢杆菌N1729 对棉花病原菌的抑菌效果, 结果表明该菌对棉花立枯病菌、枯萎病菌和黄萎病菌均具有较强的抑菌作用, 其中对立枯病菌的抑制率为45.7%, 该菌无细胞滤液对以上3 种病原菌具有一定的抑菌作用。本研究结果表明, 投施枯草芽孢杆菌28 d, 试验组细菌总数和弧菌总数显著低于对照组水平, 显示出了枯草芽孢杆菌对海水中的弧菌具有良好的拮抗作用, 与上述的研究观点一致。证实了枯草芽孢杆菌对底泥和泥蚶体内一些细菌和条件性致病菌弧菌具有拮抗作用。
许多研究证实枯草芽孢杆菌可以改善水体和体内细菌菌群变化。伏传永报道每升海水中加入3.0~ 4.0 mL 枯草芽孢杆菌菌液即可较有效地控制养殖海水中弧菌和屈挠杆菌的数量。本研究发现在投喂芽孢杆菌的前7 d 内, 3 个试验组中的底泥和体内细菌总数不断升高, 呈现相似的增长趋势, 这可能是芽孢杆菌促进了有益菌群的生长或与芽孢杆菌的投入量有关; 而在7 ~ 14 d 后细菌总数显著降低, 表明枯草芽孢杆菌对细菌的拮抗作用显示出一定的效果, 抑制了有害细菌的生长与自身新陈代谢的结果; 在14~ 30 d内基本保持平衡, 最终底泥和泥蚶体内的细菌总数明显低于对照组, 说明在这个时期, 以枯草芽孢杆菌为主的微生态制剂在改善养殖水体环境, 使养殖底泥和泥蚶体内保持微生态平衡。这些微生物生态平衡与水体菌群变化, 具体机制如何, 还有待于进一步的研究证实。
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